细菌实验室诊断的心得体会报告 观察细菌的心得体会(5篇)

心中有不少心得体会时，不如来好好地做个总结，写一篇心得体会，如此可以一直更新迭代自己的想法。我们如何才能写得一篇优质的心得体会呢？那么下面我就给大家讲一讲心得体会怎么写才比较好，我们一起来看一看吧。

主题细菌实验室诊断的心得体会报告一

（1）了解培养基的配置原理和方法，掌握分离培养微生物的有关准备工作。

（2）掌握高压灭菌方法及原理

（1）培养基的制备原理：

培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。

从营养角度分析：

营养：碳源、氮源、能源、生长素、水分和无机盐等；?适宜的酸碱度(ph值)和一定缓冲能力；?一定的氧化还原电位；?合适的渗透压。

琼脂是从石花菜等海藻中提取的胶体物质，是应用最广的凝固剂。加琼脂制成的培养基在98～100℃下融化，于45℃以下凝固，不容易被微生物污染。但多次反复融化，其凝固性降低。

（2）湿热灭菌原理－高压蒸汽灭菌

在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温

度也随之增加。在0.1mpa的压力下，锅内温度达121℃。在此蒸汽温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。

实验材料与方法

配制培养基所需器材

实验设备：高压蒸汽灭菌器。

实验器材：500ml三角烧瓶、蓝盖瓶、5ml刻度吸管、培养基、天平、砝码、

称量纸、药勺、500ml、100ml量筒、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐、平皿、剪刀等。

培养基等集中放讲台前高压桶内，送到洗刷室统一高压灭菌条件及注意事项

高压灭菌条件：121.3℃，15min。含糖培养基113℃，15min。

倒平板电炉加热灭菌好的培养基打开平皿包装倒平板（10块）注意事项：空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）。

a.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

b.瓶口要过火焰。

c.左手掀开平皿小口。

d.倾注满皿底再多一点，约10ml（7cm直径平皿）。

e.推放一边要轻缓，不能晃起琼脂挂壁，易在培养过程中污染杂菌。

f.完全凝固再翻转平板放塑料筐内，4℃备用。

（1）如何证明培养基灭菌是否彻底?

把灭菌后的培养基按灭菌锅内的不同位置，每处抽取数管(瓶)，标上记号，置25℃～30℃培养一周左右进行检查。如果培养基没有什么变化，说明灭菌效果良好；如果某一位置的培养基出现了杂菌菌落，可能是摆放的太紧，导致蒸汽不畅，或锅的结构不合理等原因所致，应根据上述情况进行改进；如果大部分或全部菌种瓶都出现杂菌，说明灭菌温度或灭菌时间不够，应提高压力或延长灭菌时间。经过几次检验都证明能彻底灭菌后，以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

经过几次检验都证明能彻底灭菌后,以后按同样条件灭菌的则不必进行检查。

（2）为什么说消毒与灭菌是微生物学和临床医学必不可少的基本知识?由于病原生物广泛存在于自然界，可通过不同途径和媒介进入人体，引起感染或造成疾病流行。因此，杀灭或清除存在于体外传播媒介上的病原生物，对于切断传播途径、预防和控制其感染具有重要意义。自古以来，人们就利用煮沸、火烧、日晒等方法杀灭或去除微生物，达到预防疾病的目的。实际上，除了在临床医疗实践中需要防止微生物的污染或感染外，在微生物学实验室、食物保存、饮水净化、药品与生物制品生产等过程中都需要避免微生物的污染。

接种是微生物实验及科学研究中一项基本操作技术。根据实验目的和要求，

选择合适的接种工具与接种方法，接种工具有接种环、接种针、接种铲、接种钩、吸管、滴管、棉签等。常用接种方法有：斜面接种，液体接种，穿刺接种，平板接种和固体接种。接种的关键是无菌操作。

无菌操作的原则：在酒精灯火焰旁进行，所有器皿均须严格消毒，培养基应事先做无菌试验，

接种工具使用前后须经火焰烧灼灭菌，棉塞不能乱放，始终夹在手指中。在培养四大类微生物时应注意选择适宜的培养条件。多数细菌为专性需氧菌与兼性需氧菌，少数为厌氧菌。多数食品腐败菌和工业用菌种，以及人和动物病原菌的最适生长温度为37℃，并且在近中性（ph6.5～7.5）条件下生长良好。多数放线菌为好氧菌，少数为厌氧菌，最适生长温度为28～30℃，多数适宜在偏碱性环境中生长（ph7.5～8.5）。

（1）实验材料：实验设备：温箱。

实验器材：毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假丝酵母、新生隐球酵母菌、细黄链霉菌、pda平板、高盐察氏平板、高氏合成i号平板、塑料筐、20%甘油水溶液、镊子、接种铲、无菌盖玻片、无菌滤纸、无菌载玻片、石棉网、牛皮纸、硫酸纸、橡皮筋、铁丝筐等。

（2）实验方法：平板接种：毛霉→pda平板（点植法）

啤酒酵母→pda平板（五区分离划线法）青霉、曲霉→pda平板（连续划线法）

1、取灭菌后小室平皿。

2、取无菌pda琼脂薄层平板，用镊子夹住盖玻片切割成0.5～1.0cm2的琼脂块，并将其移至培养小室中的载玻片上，制作过程注意无菌。

3、用接种环取少量霉菌的`孢子接种于培养基四周，用无菌镊子

将盖玻片覆盖在琼脂块上，并(转载于:l灭菌的20%甘油（用于保持湿度），盖上皿盖，标记，置28～30℃培养3～5d

1.取粮食样品20g,放入无菌烧杯，加无菌水洗涤，

反复10次，弃去水后，将粮粒倒于平皿内备用2.镊子取粮食种入pda琼脂内，每皿可接种5-10粒。

放线菌的接种：取细黄链霉菌划线法接种，在接种的划线处，无

菌操作斜插入盖玻片数张。

1.空气环境无菌（应在酒精灯火焰周围无菌区）

2.在酒精灯火焰处，倾斜打开瓶口。

3.接种环使用前，直接在酒精灯上烧灼灭菌，把环和金属丝烧红即可。

4.接种环使用后，先在火焰周围把环上标本烤干，再烧灼灭菌，以免标本汽化，爆烈四溅，污染环境。5.金属杆快速通过火焰2－3次，杀灭表面微生物

1、粮食中产毒真菌的种类及产生毒素？

青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、细黄链霉菌（放线菌）青霉素、丝生毛霉素、黄曲霉素、根霉素、白念菌素。细黄链菌素

2、常用霉菌培养基有哪些？

马铃薯蔗糖培养基

豆芽汁葡萄糖（或蔗糖）琼脂培养基察氏培养基

3、霉菌的接种方法有何不同？为什么？

（1）连续划线法（青霉、曲霉）

青霉与曲霉为局限性生长的霉菌。应采用连续划线接种法接种。（2）点植法（根霉、毛霉）

根霉与毛霉生长区域比较大，应采用点植法。（3）小室载玻片培养法（青霉、毛霉、根霉、曲霉）

实验三霉菌的制片与形态观察

实验目的：学习并掌握观察霉菌形态的基本方法；

了解四类常见霉菌的基本形态特征。了解放线菌的基本形态特征。

实验原理：霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约为3-10μm）,常是细

菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。霉菌菌丝较粗大，细胞易收缩变形，且孢子容易飞散，所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液，用此染液做霉菌制片的特点是细胞不变形，具有杀菌、防腐作用，不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，棉兰具有一定的染色作用，染液的蓝色能增大反差。

（一）菌种：在马铃薯琼脂平板上培养3—4天的青霉(penicilliumsp.)、曲霉(aspergillussp.)、毛霉（mucorsp.）、根霉；

（二）器材及用具：镊子、载玻片、盖玻片、显微镜。

（一）直接制片观察

于洁净载玻片上，用镊子取霉菌菌落的边缘处取小量带有孢子的菌丝，然后小心地盖上盖玻

片。置显微镜下先用低倍镜观察，必要时再换高倍镜（二）小室培养观察

将载玻片直接放低倍镜下观察，再换高倍镜观察。

观察原则：

毛霉：用低倍镜观察孢子囊梗、囊轴等。用高倍镜观察孢子囊孢子的形

状、大小。

根霉：菌丝、孢子同毛霉，注意观察有无假根。

曲霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子着生位置，辨认分生孢

子梗、顶囊、小梗和分生孢子。

青霉：在高倍镜下观察菌丝有无隔膜，分生孢子梗、副枝、小梗和分生

孢子的形状等。实验结果：

分析与讨论：

青霉和曲霉的形态有哪些异同？

青霉常分布在霉腐变质的水果、蔬菜、粮食和皮革等物体上，菌体直立菌丝的顶端长有扫帚状的结构，结构的每一个分枝上，生有成串的孢子，成熟的孢子呈青绿色，进行孢子生殖。

曲霉广泛分布在谷物、空气和土壤中，曲霉直立菌丝的顶端膨大成球状，球状结构的表面放射状地生有成串的孢子，孢子随曲霉种类的不同而呈黄色、橙色或黑色。

从皮肤取材查真菌如何检查？

主题细菌实验室诊断的心得体会报告二

流感病毒颗粒表面的血凝素（ha）蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，ha试验由此得名。ha蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰ha蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。

该试验是目前who进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。可用于流感病毒分离株ha亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。

只有当抗原和抗体ha亚型相一致时才能出现hi现象，各亚型间无明显交叉反应；除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素；需要在每次试验时进行抗原标准化；需要正确判读的技能。

1  阿氏（alsevers）液配制

称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml，散热溶解后调ph值至6.1，

69kpa 15min高压灭菌，4℃保存备用。（3.8%枸橼酸钠（3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水），101 kpa,20min高压灭菌，4℃保存备用,保存期1个月）。

2  10%和1%鸡红细胞液的制备

2.1采血

用注射器吸取阿氏液约1ml（3.8%枸橼酸钠），取至少2只spf鸡（如果没有spf鸡，可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡），采血约2～4ml，与阿氏液混合（3.8%枸橼酸钠），放入装10ml阿氏液（生理盐水）的离心管中混匀。

2.2 洗涤鸡红细胞

将离心管中的血液经1500～1800 r/min 离心8分钟，弃上清液，沉淀物加入阿氏液（生理盐水），轻轻混合，再经1500～1800 r/min离心8分钟，用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，再重复2次以上过程后，加入阿氏液20 ml（生理盐水），轻轻混合成红细胞悬液，4℃保存备用，不超过5天。

2.3  10%鸡红细胞悬液

取阿氏液保存不超过5天的红细胞，在锥形刻度离心管中离心1500～1800 r/min 8分钟，弃去上清液，准确观察刻度离心管中红细胞体积(ml)，加入9倍体积(ml)的生理盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。（此步

可省略，直接配制1%红细胞）

2.4  1%鸡红细胞液

取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1 ml，加入9 ml生理盐水，混合均匀即可。（根据检测血清的数量，估算一下需要的1%鸡红细胞量，可按0.3ml/每份血清）

3 抗原血凝效价测定（ha试验，微量法）

3.1 在微量反应板的1孔～12孔均加入25μl pbs（生理盐水），换滴头。

3.2吸取25μl抗原加入第l孔，混匀。

3.3从第1孔吸取25μl，病毒液加入第2孔，混匀后吸取25μl加入第3孔，如此进行倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取25μl弃之，换滴头。

3.4每孔再加入25μl pbs（生理盐水）。

3.5每孔均加入25μl 体积分数为1%鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）。

3.6振荡混匀，在室温（20～25℃）下静置40min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下反应1小时）。对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。

3.7结果判定  将板倾斜，观察血凝板，判读结果。

能使红细胞完全凝集（100%凝集，++++）的抗原最高稀释度为该抗原的血凝效价，此效价为1个血凝单位（hau）。注意对照孔应呈现完全不凝集（-），否则此次检验无效。

4 血凝抑制（hi）试验（微量法）

4.1 根据3的试验结果配制4hau的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4hau的抗原的稀释倍数。例如，如果血凝的终点滴度为1:256，则4hau抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）。

4.2 在微量反应板的1孔～11孔加入25μl pbs（生理盐水），第12孔加入50μl pbs（生理盐水）。

4.3 吸取25μl血清加入第1孔内，充分混匀后吸25μl于第2孔，依次倍比稀释至第10孔，从第10孔吸取25μl弃去。

4.4 1孔～11孔均加入含4hau抗原25μl，室温（约20℃）静置至少30min。

4.5 每孔加入25μl 1%的鸡红细胞悬液混匀，轻轻混匀，静置约40min（室温约20℃，若环境温度太高可置4℃条件下进行），对照红细胞将呈现钮扣状沉于孔底。

4.6 结果判定

试验成立的条件：只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2，阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。

以完全抑制4hau抗原的血清最高稀释倍数作为hi滴度。

hi价小于或等于31og2判定hi试验阴性；hi价大于或等于41og2为阳性。

1、合理选择抗原和对照阳性血清。针对re-4和re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。

同一亚型的禽流感病毒制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性差异，从而使检测同一血清的结果有差别。一般来讲，疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的hi效价较高。

2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用，冻干的试剂应按照说明中规定的体积重新溶解并保存。要避免杂菌污染，因为污染所造成的非流感起源的凝集素也可与所有抗血清发生非特异反应。为避免反复冻融和细菌污染，可以无菌操作将试剂分装成小包装。

3、反应温度不能太高。若在37℃ （如温箱）下进行，

主题细菌实验室诊断的心得体会报告三

流感病毒颗粒表面的血凝素（ha）蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，ha试验由此得名。ha蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰ha蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。

该试验是目前who进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。可用于流感病毒分离株ha亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。

只有当抗原和抗体ha亚型相一致时才能出现hi现象，各亚型间无明显交叉反应；除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素；需要在每次试验时进行抗原标准化；需要正确判读的技能。

1  阿氏（alsevers）液配制

称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml，散热溶解后调ph值至6.1，

69kpa 15min高压灭菌，4℃保存备用。（3.8%枸橼酸钠（3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水），101 kpa,20min高压灭菌，4℃保存备用,保存期1个月）。

2  10%和1%鸡红细胞液的制备

2.1采血

用注射器吸取阿氏液约1ml（3.8%枸橼酸钠），取至少2只spf鸡（如果没有spf鸡，可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡），采血约2～4ml，与阿氏液混合（3.8%枸橼酸钠），放入装10ml阿氏液（生理盐水）的离心管中混匀。

2.2 洗涤鸡红细胞

将离心管中的血液经1500～1800 r/min 离心8分钟，弃上清液，沉淀物加入阿氏液（生理盐水），轻轻混合，再经1500～1800 r/min离心8分钟，用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，再重复2次以上过程后，加入阿氏液20 ml（生理盐水），轻轻混合成红细胞悬液，4℃保存备用，不超过5天。

2.3  10%鸡红细胞悬液

取阿氏液保存不超过5天的红细胞，在锥形刻度离心管中离心1500～1800 r/min 8分钟，弃去上清液，准确观察刻度离心管中红细胞体积(ml)，加入9倍体积(ml)的生理盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。（此步

可省略，直接配制1%红细胞）

2.4  1%鸡红细胞液

取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1 ml，加入9 ml生理盐水，混合均匀即可。（根据检测血清的数量，估算一下需要的1%鸡红细胞量，可按0.3ml/每份血清）

3 抗原血凝效价测定（ha试验，微量法）

3.1 在微量反应板的1孔～12孔均加入25μl pbs（生理盐水），换滴头。

3.2吸取25μl抗原加入第l孔，混匀。

3.3从第1孔吸取25μl，病毒液加入第2孔，混匀后吸取25μl加入第3孔，如此进行倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取25μl弃之，换滴头。

3.4每孔再加入25μl pbs（生理盐水）。

3.5每孔均加入25μl 体积分数为1%鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）。

3.6振荡混匀，在室温（20～25℃）下静置40min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下反应1小时）。对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。

3.7结果判定  将板倾斜，观察血凝板，判读结果。

能使红细胞完全凝集（100%凝集，++++）的抗原最高稀释度为该抗原的血凝效价，此效价为1个血凝单位（hau）。注意对照孔应呈现完全不凝集（-），否则此次检验无效。

4 血凝抑制（hi）试验（微量法）

4.1 根据3的试验结果配制4hau的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4hau的抗原的稀释倍数。例如，如果血凝的终点滴度为1:256，则4hau抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）。

4.2 在微量反应板的1孔～11孔加入25μl pbs（生理盐水），第12孔加入50μl pbs（生理盐水）。

4.3 吸取25μl血清加入第1孔内，充分混匀后吸25μl于第2孔，依次倍比稀释至第10孔，从第10孔吸取25μl弃去。

4.4 1孔～11孔均加入含4hau抗原25μl，室温（约20℃）静置至少30min。

4.5 每孔加入25μl 1%的鸡红细胞悬液混匀，轻轻混匀，静置约40min（室温约20℃，若环境温度太高可置4℃条件下进行），对照红细胞将呈现钮扣状沉于孔底。

4.6 结果判定

试验成立的条件：只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2，阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。

以完全抑制4hau抗原的血清最高稀释倍数作为hi滴度。

hi价小于或等于31og2判定hi试验阴性；hi价大于或等于41og2为阳性。

1、合理选择抗原和对照阳性血清。针对re-4和re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。

同一亚型的禽流感病毒制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性差异，从而使检测同一血清的结果有差别。一般来讲，疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的hi效价较高。

2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用，冻干的试剂应按照说明中规定的体积重新溶解并保存。要避免杂菌污染，因为污染所造成的非流感起源的凝集素也可与所有抗血清发生非特异反应。为避免反复冻融和细菌污染，可以无菌操作将试剂分装成小包装。

3、反应温度不能太高。若在37℃ （如温箱）下进行，

主题细菌实验室诊断的心得体会报告四

流感病毒颗粒表面的血凝素（ha）蛋白，具有识别并吸附于红细胞表面受体的结构，ha试验由此得名。ha蛋白的抗体与受体的特异性结合能够干扰ha蛋白与红细胞受体的结合从而出现抑制现象。

该试验是目前who进行全球流感监测所普遍采用的试验方法。可用于流感病毒分离株ha亚型的鉴定，也可用来检测禽血清中是否有与抗原亚型一致的感染或免疫抗体。

只有当抗原和抗体ha亚型相一致时才能出现hi现象，各亚型间无明显交叉反应；除鸡血清以外，用鸡红细胞检测哺乳动物和水禽的血清时需要除去存在于血清中的非特异凝集素；需要在每次试验时进行抗原标准化；需要正确判读的技能。

1  阿氏（alsevers）液配制

称量葡萄糖2.05g、柠檬酸钠0.8g、柠檬酸0.055g、氯化钠0.42g，加蒸馏水至100ml，散热溶解后调ph值至6.1，

69kpa 15min高压灭菌，4℃保存备用。（3.8%枸橼酸钠（3.8g枸橼酸钠，100ml超纯水），101 kpa,20min高压灭菌，4℃保存备用,保存期1个月）。

2  10%和1%鸡红细胞液的制备

2.1采血

用注射器吸取阿氏液约1ml（3.8%枸橼酸钠），取至少2只spf鸡（如果没有spf鸡，可用常规试验证明体内无禽流感和新城疫抗体的鸡），采血约2～4ml，与阿氏液混合（3.8%枸橼酸钠），放入装10ml阿氏液（生理盐水）的离心管中混匀。

2.2 洗涤鸡红细胞

将离心管中的血液经1500～1800 r/min 离心8分钟，弃上清液，沉淀物加入阿氏液（生理盐水），轻轻混合，再经1500～1800 r/min离心8分钟，用吸管移去上清液及沉淀红细胞上层的白细胞薄膜，再重复2次以上过程后，加入阿氏液20 ml（生理盐水），轻轻混合成红细胞悬液，4℃保存备用，不超过5天。

2.3  10%鸡红细胞悬液

取阿氏液保存不超过5天的红细胞，在锥形刻度离心管中离心1500～1800 r/min 8分钟，弃去上清液，准确观察刻度离心管中红细胞体积(ml)，加入9倍体积(ml)的生理盐水，用吸管反复吹吸使生理盐水与红细胞混合均匀。（此步

可省略，直接配制1%红细胞）

2.4  1%鸡红细胞液

取混合均匀的10%鸡红细胞悬液1 ml，加入9 ml生理盐水，混合均匀即可。（根据检测血清的数量，估算一下需要的1%鸡红细胞量，可按0.3ml/每份血清）

3 抗原血凝效价测定（ha试验，微量法）

3.1 在微量反应板的1孔～12孔均加入25μl pbs（生理盐水），换滴头。

3.2吸取25μl抗原加入第l孔，混匀。

3.3从第1孔吸取25μl，病毒液加入第2孔，混匀后吸取25μl加入第3孔，如此进行倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取25μl弃之，换滴头。

3.4每孔再加入25μl pbs（生理盐水）。

3.5每孔均加入25μl 体积分数为1%鸡红细胞悬液（将鸡红细胞悬液充分摇匀后加入）。

3.6振荡混匀，在室温（20～25℃）下静置40min后观察结果（如果环境温度太高，可置4℃环境下反应1小时）。对照孔红细胞将呈明显的钮扣状沉到孔底。

3.7结果判定  将板倾斜，观察血凝板，判读结果。

能使红细胞完全凝集（100%凝集，++++）的抗原最高稀释度为该抗原的血凝效价，此效价为1个血凝单位（hau）。注意对照孔应呈现完全不凝集（-），否则此次检验无效。

4 血凝抑制（hi）试验（微量法）

4.1 根据3的试验结果配制4hau的病毒抗原。以完全血凝的病毒最高稀释倍数作为终点，终点稀释倍数除以4即为含4hau的抗原的稀释倍数。例如，如果血凝的终点滴度为1:256，则4hau抗原的稀释倍数应是1:64（256除以4）。

4.2 在微量反应板的1孔～11孔加入25μl pbs（生理盐水），第12孔加入50μl pbs（生理盐水）。

4.3 吸取25μl血清加入第1孔内，充分混匀后吸25μl于第2孔，依次倍比稀释至第10孔，从第10孔吸取25μl弃去。

4.4 1孔～11孔均加入含4hau抗原25μl，室温（约20℃）静置至少30min。

4.5 每孔加入25μl 1%的鸡红细胞悬液混匀，轻轻混匀，静置约40min（室温约20℃，若环境温度太高可置4℃条件下进行），对照红细胞将呈现钮扣状沉于孔底。

4.6 结果判定

试验成立的条件：只有阴性对照孔血清滴度不大于21og2，阳性对照孔血清误差不超过1个滴度，试验结果才有效。

以完全抑制4hau抗原的血清最高稀释倍数作为hi滴度。

hi价小于或等于31og2判定hi试验阴性；hi价大于或等于41og2为阳性。

1、合理选择抗原和对照阳性血清。针对re-4和re-5株疫苗免疫采用相应抗原和对照阳性血清。

同一亚型的禽流感病毒制成的抗原，如果毒株来源不同，则可能会存在抗原性差异，从而使检测同一血清的结果有差别。一般来讲，疫苗种毒株如果与抗原所用毒株相同时，则所测得的hi效价较高。

2、合理使用和保存抗原。反应试剂要按规定保存和使用，冻干的试剂应按照说明中规定的体积重新溶解并保存。要避免杂菌污染，因为污染所造成的非流感起源的凝集素也可与所有抗血清发生非特异反应。为避免反复冻融和细菌污染，可以无菌操作将试剂分装成小包装。

3、反应温度不能太高。若在37℃ （如温箱）下进行，

主题细菌实验室诊断的心得体会报告五

----- 目的：对于学校实验室安全情况调查。

时间：20xx年4月25日

地点：博学楼

小组成员：

为了了解我校实验室安全情况，所以本组决定对我校博学楼实验室安全情况进行调研。

一、博学楼楼道安全情况。

在博学楼的每层楼道靠近楼梯处都会有一个保健箱，保健箱里都有一些和本层实验有关的防护药品，并且每层实验室都配备有消防栓和沙桶以防实验室着火。并且实验室楼梯分为两道，当实验室出现安全问题是有利于撤离人员的分流使其可以安全快速的撤离。

二、博学楼实验室布置情况。

在博学楼每一层的实验室都分布在同一侧实验室的对面分部多个楼梯口，有利于实验人员的有序离开。并且博学楼的每层都会有几个值班室，值班室内都会有老师值班，若实验出现安全问题可以及时反映。

三、博学楼部分实验室安全情况。

由于实验室过多所以选取了部分实验室进行调研。博学楼的每个实验室内都会根据具体的实验情况配备2个灭火器，并且实验室大小可以容纳1个班(大约32人)一起实验，可以减少事故的发生。在每个实验室的黑板上都会写上本实验室所做的实验以及步骤和注意事项，每次实验后老师都会检查实验室后再离开，这样可以减少实验室的安全隐患。但是实验室内也有不足的地方，大多数实验室需要的药品都是装在大的药缸中放在地上，这样的做法不利于人员的移动以及倒取化学试剂。

结尾：我认为我校实验楼——博学楼基本符合实验室安全规范，但是在实验室内试剂的存放布置略有不足，我认为应该购买专用的柜子存放试剂，或者在没层设计一个试剂存储室由值班老师管理。

对于植保院昆虫生态学实验室现状调研报告

--化工一班

近日，应选修课要求，我对本校博学楼内的昆虫生态实验室展开了调研。本次调研的方法主要是资料调查和实地抽样。

作物病虫生物防治研究所正式成立于1981年，原为1962年建立的寄生蜂标本室、1973年更名为生物防治研究室，同我国著名昆虫学家赵修复教授创办。该所下设昆虫分类、天敌昆虫应用、昆虫行为及昆虫生态研究室，并建有福建省重点公共实验室――昆虫生态实验室

拥有主动式系列人工气候箱、被动式系列人工气候箱、高级显微镜和解剖镜、昆虫标本等齐全的科研设备。是作物病虫生物防治基础理论和应用开发的专门研究机构，经过长期不懈的努力，在昆虫分类、生物防治、昆虫生态等研究方向形成了自己的优势与特色。

那天我去昆虫生态实验室调查的时候，由于时间略晚，实验室只有一位研究员在昆虫生态实验室里，而且她忙于使用显微镜展开对课题的研究，我就没有过多的打扰她，只是在征求了她的同意后，对实验室展开设备和实验环境的调查，并没用涉及实验室人员的组成情况。

昆虫生态实验室约60平方米，实验室内摆放了各种科研设备，有sukum、人工气候箱、高级显微镜和解剖镜等，由于专业知识不懂，我也无法辨别它们的好坏，但从表象来说是运行良好的，当然也有部分老旧仪器放置在角室中落里的。在众多大型实验设备面前，昆虫生态实验室60平方米的地方确实略显拥挤，致使大型设备不得不“肩并肩”的摆放在实验室内，这对设备的工作状态造成影响。

虽然由于傍晚的原因，实验室中的光线并不好,但有部分地方的确是显得有些脏乱，玻璃仪器、试剂的摆放也不够规范。当然，这也有可能是实验室还处在实验过程中，被我“突击检查”，并没用来得及收拾的原因。

经过这次对昆虫生态实验室的调查，我发现实验场地过于狭小是制约实验室发展的一个重要因素，为此，我还特意去多个实验室走访过，例如细菌实验室。实验室过于狭小的实验环境，在日新月异的实验设备面前明显不够看，这不但间接减少了设备的使用寿命，而且容易造成有危险的生物泄露事件，比如不慎打翻某个细菌病毒的培养皿，造成危害等。

关于动物养殖安全的调研报告

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目的:对动物养殖方面的认识与增强安全防范意思

地点: 创业园

时间：20xx-4-29

组员：

在创业园动物科学园地与大二的学长学姐一起参观兔子的起食饮居， 了解关于兔子的一些养殖情况，对兔舍的卫生环境保护有初步的了解。

当时下着小雨，兔舍的环境相对潮湿，兔舍的好处有一点可见就是隔空建筑的，底下可容污水排出，防雨防潮……

学长告诉我，兔子基本上是作为宠物兔出售给校内的同学，可食用，所以兔子的卫生足够重要，对于现在h7n9的传染，相对的兔舍

卫生更要做好，尤其是夏季的即将到来，兔舍的卫生将是重中之重。

1.兔舍都会定期进行环境消毒，食具消毒等，对于那些生病的还有可能有病的兔子将会送到兽医那里去治疗(我去的时候，刚好有一只母兔子患病，已经有些天没吃了。他们正准备送往兽医处治疗);

2.给予兔子足够的饮用水，添加维生素c等;

3.定期对兔子进行防疫检验，统计数据，分类编号;

4.饲料保持卫生干燥，不喂养不干净食物，精心喂养;

5.在外围有种植树木，遮阴挡雨，保持兔舍的通风阴凉，有藤蔓植物的存在;

6.保持兔舍的安静，避免兔子受到应激影响，引起恐慌(我们去的时候保持相对安静的交谈从而了解情况)

综上：通过本次的调研，了解到兔舍卫生保持的重要性，各种禽流感的爆发或者疫情的传染大多是人为不知道维护动物的卫生与人类间的关系造成的，所以维护动物的卫生，了解饲养动物的安全方法是我们每个人的义务，并且这样才能真正实现生物安全与预防的关键意义，使我们更好地保护我们自己。

关于博学楼实验室安全隐患调研

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由于课程的原因经常要到博学楼做化学实验,故对博学楼实验室可能存在的安全隐患做了调研.通过自身参与实验以及和参与实验的同学进行交流和讨论发现实验室存在以下安全隐患:

(一)用水用电用气的控制;

(二)用火的控制;

(三)易燃、易爆品的控制;

(四)化学试剂和毒品及腐蚀品的控制;

(五)实验使用者对实验器材的不规范操作和对实验室安全知识的欠缺

询问实验室工作人员和上课老师并查阅相关资料,针对上述实验室安全隐患,对应防范和处理方法如下:

(一)用水用电用气的控制

1、进入实验室开始工作前应了解煤气总阀门、水阀门及电闸所在处。离开实验室时，一定要将室内检查一遍，应将水、电、煤气的开关 好，门窗锁好。

2、使用煤气灯时，应先将火柴点燃，一手执火柴紧靠进灯口，一手慢开煤气门。不能先开煤气门，后燃火柴。灯焰大小和火力强弱，应根据实验的需要来调节。用火时，应做到火着人在，人走火灭。

3.使用电器设备(如烘箱、恒温水浴、离心机、电炉等)时，严防触电;绝不可用湿手或在眼睛旁视时开关电闸和电器开关。应该用试电笔检查电器设备是否漏电，凡是漏电的仪器，一律不能使用。

(二)用火的控制;

实验中一旦发生了火灾切不可惊慌失措，应保持镇静。首先立即切断室内一切火源和电源。然后根据具体情况正确地进行抢救和灭火。常用的方法有：

1.在可燃液体燃着时，应立即拿开着火区域内的一切可燃物质，关闭通风器，防止扩大燃烧。若着火面积较小，可用抹布、湿布、铁片或沙土覆盖，隔绝空气使之熄灭。但覆盖时要轻，避免碰坏或打翻盛有易燃溶剂的玻璃器皿，导致更多的溶剂流出而再着火。

2.酒精及他可溶于水的液体着火时，可用水灭火。

3.汽油、乙醚、甲苯等有机溶剂着火时，应用石棉布或砂土扑灭。绝对不能用水，否则反而会扩大燃烧面积。

4.金属钠着火时，可把砂子倒在它的上面。

5.导线着火时不能用水及二氧化碳灭火器，应切断电源或用四氯化碳灭火器。

6.衣服烧着时切忌奔走，可用衣服、大衣等包裹身体或躺在地上滚动，以灭火。

7.发生火灾时应注意保护现场。较大的着火事故应立即报警。

(三)易燃、易爆品的控制;

1.使用可燃物，特别是易燃物(如乙醚、丙酮、乙醇、苯、金属钠等)时，应特别小心。不要大量放在桌上，更不要在靠近火焰处。只有在远离火源时，或将火焰熄灭后，才可大量倾倒易燃液体。低沸点的有机溶剂不准在火上直接加热，只能在水浴上利用回流冷凝管加热或蒸馏。

2.如果不慎倾出了相当量的易燃液体，则应按下法处理：

(1)立即关闭室内所有的火源和电加热器。

(2)关门，开启小窗及窗户。

(3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体，并将液体拧到大的容器中，然后再倒入带塞的玻璃瓶中。

3.用油浴操作时，应小心加热，不断用温度计测量，不要使温度超过油的燃烧温度。

4.易燃和易爆炸物质的残渣(如金属钠、白磷、火柴头)不得倒入污物桶或水槽中，应收集在指定的容器内。

(四)化学试剂和毒品及腐蚀品的控制;

1.使用浓酸、浓碱，必须极为小心地操作，防止溅出。用移液管量取这些试剂时，必须使用橡皮球，绝对不能用口吸取。若不慎溅在实验台上或地面，必须及时用湿抹布擦洗干净。如果触及皮肤应立即治疗。

2.废液，特别是强酸和强碱不能直接倒在水槽中，应先稀释，然后倒入水槽，再用大量自来水冲洗水槽及下水道。

3.毒物应按实验室的规定办理审批手续后领取，使用时严格操作，用后妥善处理。

(五)实验使用者对实验器材的不规范操作和对实验室安全知识的欠缺

在新生进入实验室前应进行实验室安全知识教育，实验前学生应进行相关实验的有关器材有一定的了解做好课前预习准备。顶起对学生进行实验室安全知识的测查让学生能牢记相关注意事项。

实验室安全应得到重视，实验室管理者本身应加强药品的管理定期进行安全检查完善相关安全措施，实验室使用者应对实验过程所使用到的药品和仪器有一定的了解并在专业人员在场情况下进行实验。无论是实验室的管理者或使用者都应将实验室的安全放在首位。

关于实验室管理制度的调研报告

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目的：对于实验室管理制度的调查

时间：4月28日

小组成员：

 1. 所有药品、标样、溶液都应有标签，绝对不要在容器内装入与标签不相符的药品。

 2. 禁止使用实验室的器皿盛装食物，也不要用茶杯、食具盛装药品，更不要用烧杯等当茶具使用。

 3. 浓酸、烧碱具有强烈的腐蚀性，切勿溅到皮肤和衣服上，使用浓硝酸、盐酸、硫酸、高氯酸、氨水时，均应在通风厨或在通风情况下操作，如不小心溅到皮肤或眼内，应立即用水冲洗，然后用5%碳酸氢纳溶液(酸腐蚀时采用)或5%硼酸溶液(碱腐蚀时采用)冲洗，最后用水冲洗。  4. 易燃溶剂加热时，必须在水浴或沙浴中进行，避免使用明火。切忌将热电炉放入实验柜中，以免发生火灾。

 5.装过强腐蚀性、可燃性、有毒或易爆物品的器皿，应由操作者亲手洗净。空试剂瓶要统一处理，不可乱扔，以免发生意外事故。

 6.移动、开启大瓶液体药品时，不能将瓶直接放在水泥地板上，最好用橡皮布或草垫垫好，若为石膏包封的可用水泡软后开启，严禁用锤砸、打，以防破裂。

 7.严禁用湿手去开启电闸和电器开关，凡漏电仪器不要使用，以免触电。  8. 消防器材要放在明显位置，严禁将消防器材移作别用。

 9. 发生事故，必须按规定及时上报有关部门，重大事故要立即抢救，保护好现场。

 10. 保持实验室环境整洁，走道畅通，设备器材摆放整齐。实验室用的所有仪器，都应严格遵守操作规程，仪器使用完毕后拔出插头，将仪器各部旋钮恢复到原位。

 11. 下班时，整理好器材、工具和各种资料，切断电源，关好门窗和水龙头。

结尾：经过这次的调研实验室管理制度让我明白了在实验室里要有认真，谨慎的态度，对任何的规章制度要遵守并保证自己不犯错误，从而使自己在实验室里能更游刃有余。